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產品名稱:Rosetta-gami (DE3) pLysS菌株(ZK261)

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ZK261 0.3ml/支 600 - + 有貨

■ 產品介紹

Rosetta-gami系列菌株來源于Origami系列宿主菌,該系列菌株的有點除了含有Origami菌株原有的TrxB和Gor基因突變提高含二硫鍵正確折疊蛋白的高效表達,同時含有Rosetta系列菌株中含有的真核細胞稀有密碼子。該菌株同時集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的優點。Rosetta-gami(DE3)pLysS系列菌株含有pRARE質粒,能夠提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六個真核細胞中的稀有密碼子tRNA,能夠有效提升真核細胞蛋白的表達水平。pRARE質粒具有氯霉素抗性。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受態細胞同時具有氯霉素,卡那,鏈霉素和四環素四種抗生素抗性。Rosetta-gami(DE3)pLysS被建議使用于含有Bla標記的氨芐抗性表達質粒。當使用pCDF系列載體時,還需要使用壯觀霉素(Spectinomycin)進行篩選。菌株中 的rpsL突變使得該菌株具有鏈霉素抗性DE3是溶源性的 λDE3, 所以帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體,及其他T7啟動子系列載體。含有pLSs質粒,pLySs質粒能夠產生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基礎表達水平。pLySs質粒使得該菌株具有氯霉素抗性。pLySs質粒的起始復制位點是p15 Origin, 這使得該質粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質粒互相共存。                  

基因型為:Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL(DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB::kan pLysSRARE2 (CamR,StrR,TetR)


■ 產品特點

Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株聚合了不同原核表達菌株的優勢:

·Rosetta-gami賦予其 Rosetta和Origami的優點——補充大腸桿菌缺乏的6種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)對應的tRNA,提高外源基因的表達水平,并且包含突變的硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase) (gor)基因,它們是還原途徑的兩個關鍵酶,其突變有利于高效形成正確折疊的含有二硫鍵的蛋白,增強蛋白的可溶性。

·該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區 (DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶)適合T7啟動子誘導的蛋白表達。

·該菌株攜帶的pLysS質粒含有表達T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達水平,但不干擾IPTG誘導的表達,適合表達毒性蛋白和非毒性蛋白。Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株具有卡那霉素,氯霉素,鏈霉素,四環素抗性,為亮氨酸生長缺陷型菌株。


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