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耐熱DNA聚合酶簡介

發布者:莊盟生物發布時間:2015-04-09瀏覽次數:3053次

合理選擇耐熱DNA聚合酶是PCR成敗與否的一個關鍵因素,如何選擇最合適的耐熱DNA聚合酶,是用戶首先考慮的問題。目前市面上有多種DNA聚合酶,雖然名稱各不相同,但主要區別在于特異性、保真性、耐熱性、擴增速率、擴增片段長度等幾個指標。

我公司生產的5種耐熱DNA聚合酶全部采用國外生產工藝和質量檢測標準生產;是經過多次分子篩,離子交換層析柱純化的,去除了宿主DNA和蛋白酶等雜質的超純型產品。特異性非常好,且特別穩定。經檢測,室溫放置1個月,活性不發生改變。


五種耐熱DNA聚合酶比較:

Taq

擴增效率最高的耐熱DNA聚合酶,能很好地擴增6kb以下的DNA片段。

Pfu

目前保真度最高的耐熱DNA聚合酶,但擴增效率低于Taq酶,能很好的擴增2kb以下的片段。一般用于點突變,基因篩選等對保真性要求很高的DNA擴增。

Taq Plus

集高效擴增和高保真度于一體,能有效地擴增10kb以下的片段,擴增效率比Pfu高,保真度比Taq酶好,對于有些結構復雜的模板,如GC含量高,有二級結構等可選用Taq Plus擴增。

HotStart

采用了創新的合成親和性配體技術,該配體可以以一種溫度依賴性的方式,可逆性地阻斷酶的活性。能最大限度的減少PCR擴增全過程中的非特異性擴增,大大提高了PCR反應的特異性。能很好地擴增6kb以下的DNA片段,PCR產物 3'端加A,可直接用于TA載體克隆。

Long Taq

具有3'到5'外切酶活性的耐熱DNA聚合酶,它不但擴增效率高而且錯配率低,對簡單模板可擴增長達40kb的片段,對復雜模板也可擴增長達15kb的片段,特別適合于長片段的擴增,如構建基因圖譜及分子遺傳學研究等。


耐熱DNA聚合酶長度、擴增效率和保真度比較

項目

Pfu

HotStart Taq

Taq

Taq Plus

Long Taq

DNA

良好地擴增

3kb

8kb

8kb

20kb

25kb

可能擴增

5kb

12kb

12kb

30kb

40kb

Genomic DNA

良好的擴增

2kb

6kb

6kb

10kb

20kb

可能擴增

4kb

8kb

8kb

20kb

40kb

擴增效率

+

+++

++++

+++

++++

保真度比較

10

1

1

5

3


注:   Pfu酶的保真度設置為10


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